胚乳培养的方法

胚乳培养的方法,胡萝卜组织培养中为什么要无菌?任何材料的组织培养都要求无菌
植物组织培养:即植物无菌培养技术,是根据植物细胞具有全能性的理论在无菌条件下 , 利用植物植物体的器官 (芽、根尖、茎尖等),、组织 (形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳、花药组织),细胞 (体细胞、生殖细胞等) , 胚胎 ( 成熟或未成熟的胚),原生质体等的一部分切下来 , 放在适当的人工培养基及光照、温度等人工条件下,诱发其产生愈伤组织或不定芽或不定根,最后长成完整的植株的技术
ttc培养基础原理?氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride , TTC),也称红四氮唑(Red tetrazoline,RT) 。
可用来测定种子活力,被种子中的还原性物质(脱氢酶)还原为红色的TTF , 从而使活种子胚着上红色而胚乳不被染色 。而死种子完全不被染色 。
1.浸泡 将待测种子在 30 ~ 35 ℃温水中浸种(大麦、小麦 6 小时,玉米 5 小时左右),以增强种胚的呼吸作用 。
2. 显色 取吸胀的种子 200 粒 , 用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半 , 将其中的一半置于 2 只培养皿中,每皿 100 个半粒 , 加入适量的 0.5% TTC 溶液,以覆盖种子为度 。然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h。观察结果,凡胚被染为红色的是活种子 。将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚,作同样染色处理,作为对照观察 。
3. 计算活种子的百分率
在活细胞计数法测菌落数时可使用其防止菌落蔓延 。
种子的繁殖过程?1.吸水是干燥的种子迅速吸水,其原生质吸水后膨胀,种子体积变大 。
2.发根是当种子吸水达到饱和状态后即开始进行萌动、发芽 。发芽过程首先是胚根的伸长,逐渐从种脐处露出 。
3.发芽是种子随着胚根的继续伸长,种肧的胚轴也开始伸长 。
4.子叶展开
种子从吸胀开始的一系列有序的生理过程和形态发生过程 , 大致可分五个阶段:
一、吸胀
为物理过程 。种子浸于水中或落到潮湿的土壤中,其内的亲水性物质便吸引水分子,使种子体积迅速增大(有时可增大1倍以上) 。吸胀开始时吸水较快,以后逐渐减慢 。种子吸胀时会有很大的力量 , 甚至可以把玻璃瓶撑碎 。吸胀的结果使种皮变软或破裂,种皮对气体等的通透性增加,萌发开始 。
二、水合与酶的活化
这个阶段吸胀基本结束,种子细胞的细胞壁和原生质发生水合,原生质从凝胶状态转变为溶胶状态 。各种酶开始活化,呼吸和代谢作用急剧增强 。如大麦种子吸胀后,胚首先释放赤霉素并转移至糊粉层 , 在此诱导水解酶(α-淀粉酶、蛋白酶等)的合成 。
水解酶将胚乳中贮存的淀粉、蛋白质水解成可溶性物质(麦芽糖、葡萄糖、氨基酸等),并陆续转运到胚轴供胚生长的需要,由此而启动了一系列复杂的幼苗形态发生过程 。
种子发芽经历的四个过程
三、细胞分裂和增大
细胞分裂和增大时吸水量又迅速增加,胚开始生长,种子内贮存的营养物质开始大量消耗 。
四、胚突破种皮
胚突破种皮时胚生长后体积增大,突破种皮而外露 。大多数种子先出胚根,接着长出胚芽 。
五、长成幼苗
长成幼苗以后长出根、茎、叶,形成幼苗 。有的种子的下胚轴不伸长,子叶留在土中 , 只由上胚轴和胚芽长出土面生成幼苗,这类幼苗称为子叶留土幼苗,如豌豆、蚕豆等 。有些植物如棉花、油菜、瓜类、菜豆等的种子萌发时下胚轴伸长,把子叶顶出土面,形成子叶出土幼苗 。


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