了解转基因动物吗 认识转基因给人类做出的贡献


了解转基因动物吗 认识转基因给人类做出的贡献

文章插图
一、转基因的概述
1.遗传的基本物质是DNA , 基因则是位于染色体上有遗传效应的DNA片段 , 对于储存在生物全套染色体中的全部遗传信息 , 可称其为基因组 。由于不同种类、不同个体的生物基因组成是不同的 , 因此对动物个体来说 , 非自身的基因成分属于外源基因 , 如果把外源基因整合或导入动物染色体基因中 , 那么这个外源基因就被称为转基因(transgene)(即转移来的基因) , 这种动物就是转基因动物(transgenicanimals) 。
2.转基因动物是指将特定的外源基因导全动物受精卵或胚胎 , 使之稳定整合于动物的染色体基因组并能遗传给后代的一类动物 。
3.基因治疗(genetherapy)是指将外源正常基因导入靶细胞 , 以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病 , 以达到治疗目的 。也包括转基因等方面的技术应用 。也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中 , 使外源基因制造的产物能治疗某种疾病 。从广义说 , 基因治疗还可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术 。
二、转基因的转移方法
 一、显微注射
是最常用且成功率较高的方法 , 以转基因小鼠的制作为例 , 大致过程如下 。
1.采集受精卵
2.向受精卵雄性原核注入DNA溶液
3.将2细胞的受精卵移植到假妊娠雌性小鼠的输卵管中
【了解转基因动物吗 认识转基因给人类做出的贡献】4.导入基因的鉴定
二、反转录病毒感染法
反转录病毒具有侵入宿主细胞并整合于细胞染色体DNA的能力 。将外源基因DNA插入反转录病毒载体 , 通过辅助细胞包装成高感染度的病毒颗粒 , 感染胚胎后 , 将感染的桑椹期胚胎细胞导入子宫 , 可发育成携带外源基因的子代动物 。
该法整合率较高 , 目的基因不易破坏 , 多是单拷贝、单位点整合 , 适合于难以观察到原核的禽类受精卵 。由于病毒衣壳大小的限制 , 目的基因不宜超过10kb , 否则影响活性和稳定 。此外 , 病毒DNA可能影响外源基因在宿主动物的表达 。
三、胚胎干细胞法
(1)获取发育至一定时期的胚胎 , 经培养后 , 剥离和分散内细胞团 , 再培养 , 最后分离、扩散、鉴定ES细胞 。
(2)通过基因打靶技术 , 将外源基因经逆转录病毒感染、电脉冲法等方法导入ES细胞 , 体外培养和筛选有外源基因表达者 。
(3)获取囊胚期胚胎 , 作为ES细胞的移植受体 。
(4)通过显微操作将ES细胞注入到囊胚期胚胎的腔内 , 使之与内细胞团紧靠在一起 , 成为嵌合体 。
(5)将注射过的胚胎 , 经培养后筛选无发育缺损的囊胚 , 移植到交配第3天的假孕受体动物子宫内 , 培育出转基因动物 。
四、电脉冲法
将供体DNA与受体细胞充分混匀 , 在外界的高电压短脉冲下改变细胞膜结构 , 使细胞膜产生瞬间可逆性电穿孔 , 从而使一定大小的DNA可以通过细胞膜进入细胞 , 运送到细胞核 。
五、精子导入法
利用精子作为外源基因载体 , 借助受精作用把外源綦因导人受精卵 , 整合到受精卵的基因组中 , 称之为精子载体导入法 , 是构建转基因动物的一种新尝试 。该法简单、方便 , 依靠生理受带过程 , 免去了对原核的损伤 。但在实践中成功率较低 , 对精子是否可作为外源DNA的载体也存在争论 。目前这_技术尚处在探索阶段 。该法可以将人工授精、体外受精与转.


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